色谱柱进了大浓度的磷酸盐「色谱柱进了大浓度的磷酸盐怎么办」
朋友们,你们知道色谱柱进了大浓度的磷酸盐这个问题吗?如果不了解该问题的话,小编将详细为你解答,希望对你有所帮助!
高效液相出现双峰重叠
1、可能是色谱柱污染,如用的是C18柱可用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显要尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱。反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高再生时常用到,可换保护柱进行尝试。
2、如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现(出峰越快,双峰的可能性会减少),尤其采用单一纯物质时,可以肯定色谱柱出问题-柱头受损或柱头固定相变脏或流失。
3、可能是色谱柱污染了,用的是C18柱的话,用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显,尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱。流动相还是现配现用的好,反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高时再生时常用到。
4、所出峰比预想的小。解决方法:样品黏度过大;进样品故障或进样体积误差;检测器设置不正确.定量环体积不正确;检测池污染;检测器灯出现问题。出现双峰或肩峰。解决方法:进样量过大;样品浓度过高;保护柱或色谱柱 柱头堵塞;保护拄或色谱柱污染或失效;柱塌陷或形成短通道。前伸峰。
液相色谱柱被盐堵了怎么办
有的色谱柱是可以使用纯水冲去掉磷酸盐的。普通色谱柱是不能冲的,主要是由于水会溶解硅胶,导致相坍塌。还有的色谱柱是可以反冲。但是如果使用磷酸盐堵了,久了不用,磷酸盐结晶了,会导致硅胶颗粒受破坏,影响分离效果。 一般而言,色谱柱堵了,可以用10~30的甲醇水走柱子。
如果是盐析被堵,可以用95% 的水低流速冲, 冲洗的时候可以将柱温略微设高一点,有利于盐溶解,或是先用100%水冲(只能短时间冲,二三十分钟,时间长会损坏柱子),再用含有机相的水冲。如果是长时间走样,样品中的固体小颗粒堵了柱子,也只能反冲了。
如果你柱子已经堵了的话,用高于5%的有机相冲只会加重堵塞。先用纯水大流速冲冲吧,能救回来最好,不能就买新柱子,用的时候注意点了。带盐的缓冲要非常小心。ps,另外泵头那里好多牌子的仪器都有专门给无机盐流动相用的脱盐洗涤装置,防止泵结盐的,也去查查手册把这个打开吧。
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
清洗泵头:流动相中磷酸盐容易在乙腈中析出,每日实验前后使用10%的乙腈水或甲醇水冲洗泵头,防止堵塞。 色谱柱处理:使用至少30分钟、最好是40分钟的冲洗时间来清洗250mm*6mm的色谱柱,并在封存时使用纯甲醇或乙腈。
上缓冲盐前注意用水相比例接近的流动相过渡,用后冲洗。注意有机相比例不可以太高,特别是有机相为乙腈时,比例高了缓冲盐会析出。配置时注意观察,如出现混浊即是缓冲盐析出。
注意冲洗色谱柱;注意冲洗进样口;注意清洗泵头 所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性还不错,不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。
因此使用盐作为缓冲溶液的液相色谱仪在分析完成后,要及时使用适合的溶剂对系统进行冲洗,尽可能将系统中的盐晶体洗脱,否则长时间不处理,将极大损害液相色谱仪的使用寿命,无论进口,国产液相均如此。
各位小伙伴们,我刚刚为大家分享了有关色谱柱进了大浓度的磷酸盐的知识,希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决,欢迎随时提出哦!