高效液相柱子被磷酸盐堵住_液相柱子被盐堵住了怎么办

摘要： 好久不见，今天给各位带来的是高效液相柱子被磷酸盐堵住，文章中也会对液相柱子被盐堵住了怎么办进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！...

好久不见，今天给各位带来的是高效液相柱子被磷酸盐堵住，文章中也会对液相柱子被盐堵住了怎么办进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

怎么清洗高效液相的色谱柱

1、对于严重污染的反相柱，只能采用再生的方法。

2、冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。究竟用什么，要看你的流动相。比如，我用的是磷酸盐缓冲液-乙腈（70：30）的流动相，那么冲洗的时候最好选用10%-15%乙腈水，冲洗0ml/min，至少30min，最好40min。

3、新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点：1：用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时；2：在1的步骤下，使用甲醇：水=1：9 作为流动相冲洗柱子30分钟以上；3：完成上面2步才能用流动相冲洗柱子30分钟以上。再进样。上面得甲醇为色谱级，水一般选择超纯水、二次蒸馏水。

4、用水/有机相（10/90～5/95），以0.3-0.6ml/min流速冲洗2h以上，再用100%有机溶剂，以0.3-0.6 ml/min流速冲洗1h以上，最后用100%有机溶剂，以0 ml/min流速冲洗1h以上。

高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

1、清洗泵头：流动相中磷酸盐容易在乙腈中析出，每日实验前后使用10%的乙腈水或甲醇水冲洗泵头，防止堵塞。 色谱柱处理：使用至少30分钟、最好是40分钟的冲洗时间来清洗250mm*6mm的色谱柱，并在封存时使用纯甲醇或乙腈。

2、磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净，防止产生气泡和液相系统管路堵塞；运行过程中要开启活塞杆冲洗功能，防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损；跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱，防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞，最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱。

3、注意冲洗色谱柱；注意冲洗进样口；注意清洗泵头 所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性还不错，不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。

4、上缓冲盐前注意用水相比例接近的流动相过渡，用后冲洗。注意有机相比例不可以太高，特别是有机相为乙腈时，比例高了缓冲盐会析出。配置时注意观察，如出现混浊即是缓冲盐析出。

5、磷酸盐作为缓冲溶液的作用主要是调节PH值，由于液相色谱仪液路是一种高压系统，盐溶液在高压系统中的溶解度大大低于常压下，运行中容易过饱和，所以使用缓冲溶液的分析条件下，盐容易在液相色谱仪的色谱柱，阀件，管路中析出盐的结晶，细小的晶体极为坚硬，容易对色谱柱，单向阀，柱塞泵造成损坏。

6、用完后用，用20%甲醇水冲洗柱子和泵头，避免结晶。

高效液相出现双峰重叠

可能是色谱柱污染，如用的是C18柱可用水和乙腈多清洗一下，离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显要尽量缩短检测时间，做完后立即清洗色谱柱。反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高再生时常用到，可换保护柱进行尝试。

如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现（出峰越快，双峰的可能性会减少），尤其采用单一纯物质时，可以肯定色谱柱出问题－柱头受损或柱头固定相变脏或流失。

可能是色谱柱污染了，用的是C18柱的话，用水和乙腈多清洗一下，离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显，尽量缩短检测时间，做完后立即清洗色谱柱。流动相还是现配现用的好，反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高时再生时常用到。

用多少浓度的异丙醇冲洗高效液相系统

1、swallow13(站内联系TA)用磷酸或者磷酸盐都不需要用异丙醇洗泵 直接水洗就可以了 一般是在泵压力偏高或者污染的情况下才会用异丙醇来冲洗dalansong(站内联系TA)应该是用10%的异丙醇冲洗柱塞杆吧。

2、一个完整的HPLC系统由关键组件构成：高效泵（如四元泵）、精确进样器、高性能色谱柱、灵敏的检测器等。流动相的纯度至关重要，务必确保高纯度，避免使用含有截止波长的杂质。使用新鲜水并定期维护色谱柱，尽量避免长时间使用乙腈，以防结晶积累。

3、清洗液配制：90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力。以2-3滴/min的速度虹吸流下，不能干涸。

“如果流动相中用到了磷酸盐,应如何对高效液相柱进行洗脱?

1、确保冲洗系统：定期冲洗色谱柱以维持其性能，避免磷酸盐析出堵塞管路。 维护进样口：实验结束时使用纯水冲洗进样口，确保无残留物质。 清洗泵头：流动相中磷酸盐容易在乙腈中析出，每日实验前后使用10%的乙腈水或甲醇水冲洗泵头，防止堵塞。

2、最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。究竟用什么，要看你的流动相。

3、注意冲洗色谱柱；注意冲洗进样口；注意清洗泵头 所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性还不错，不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。

4、磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净，防止产生气泡和液相系统管路堵塞；运行过程中要开启活塞杆冲洗功能，防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损；跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱，防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞，最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱。

5、用完后用，用20%甲醇水冲洗柱子和泵头，避免结晶。

各位小伙伴们，我刚刚为大家分享了有关高效液相柱子被磷酸盐堵住的知识，希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决，欢迎随时提出哦！