本文作者:时加

磷酸盐进色谱柱,磷酸盐把色谱柱堵了

时加 2024-06-16 05:10:50 11
磷酸盐进色谱柱,磷酸盐把色谱柱堵了 摘要: 接下来,给各位带来的是磷酸盐进色谱柱的相关解答,其中也会对磷酸盐把色谱柱堵了进行详细解释,假如帮助到您,别忘了关注本站哦!...

接下来,给各位带来的是磷酸盐进色谱柱的相关解答,其中也会对磷酸盐把色谱柱堵了进行详细解释,假如帮助到您,别忘了关注本站哦!

【求助】HPLC分析样品中含有较高浓度的盐对色谱柱有影响吗?

1、硫酸盐会有杂质,我们用过浓度大得多的硫酸盐和磷酸盐!只要过滤和走梯度不出问题,色谱图就不会有问题!应该根色谱柱有关,如果有条件换根柱子试试。

磷酸盐进色谱柱,磷酸盐把色谱柱堵了

2、如果系统里面是流动相,不可以直接冲甲醇、乙腈等纯有机相,需要用10%的甲醇(乙腈)水缓冲。也是防止盐析出。色谱柱也是一样的意思。一般来说250mm*6mm的色谱柱,0ml/min至少冲洗30min,最好40min。然后如果需要封存的话,再用纯甲醇或者纯乙腈封上。进样口,这个其实不太重要。

3、③色谱柱。由于流速的限制,一般液质的色谱柱采用同样填料的HPLC色谱柱,适当减少色谱柱的长度及内径,这样不改变出峰的顺序,同时使得液质结果和HPLC更接近。如果需要提高分离度,可以选用更小颗粒的填料。④梯度或等度的影响。

4、如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中,导致柱效降低、柱压升高。采用SPE柱过滤后,可以有效减少在色谱柱中附着沉积的死吸附成分,保护色谱柱不被污染,保证其使用寿命。 3 其他,如溶液浓度、进样量等 分析物的某些性质同样能影响色谱柱的使用寿命。

如果流动相中用到了磷酸盐,应如何对高效液相柱进行洗脱?

1、注意冲洗色谱柱;注意冲洗进样口;注意清洗泵头 所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性还不错,不过在有机物当中的溶解度就不好了。它遇到甲醇、乙腈容易析出。然后就会把液相管路堵住。

磷酸盐进色谱柱,磷酸盐把色谱柱堵了

2、一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。

3、改善样品中各组分间的分离度。使用梯度洗脱时,也会使干扰分离的强保留杂质组分在较短的时间内从柱中清楚,使色谱柱保持干净状态,以进行下一次的分析。梯度洗脱一般是指流动相的组成随分析时间的延长呈现线性变化,即线性梯度洗脱,可用于反相和正相高效液相色谱仪及离子对色谱法。

4、柱子与泵都是高精密分析部件,磷酸盐无论在甲醇或乙腈中,它地溶解度都很小,在甲醇或乙腈溶液中,由于磷酸盐的溶解度很小,因此在磷酸盐流动的体系中,当直接用甲醇或乙腈流动冲洗时,就会有磷酸盐晶体析出,就如在流动相中加入了砂子,所以就会发生堵柱堵泵现象。

5、磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净,防止产生气泡和液相系统管路堵塞;运行过程中要开启活塞杆冲洗功能,防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损;跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱,防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞,最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱。

磷酸盐进色谱柱,磷酸盐把色谱柱堵了

6、阀件,管路中析出盐的结晶,细小的晶体极为坚硬,容易对色谱柱,单向阀,柱塞泵造成损坏。因此使用盐作为缓冲溶液的液相色谱仪在分析完成后,要及时使用适合的溶剂对系统进行冲洗,尽可能将系统中的盐晶体洗脱,否则长时间不处理,将极大损害液相色谱仪的使用寿命,无论进口,国产液相均如此。

液相色谱柱被盐堵了怎么办

如果是盐析被堵,可以用95% 的水低流速冲, 冲洗的时候可以将柱温略微设高一点,有利于盐溶解,或是先用100%水冲(只能短时间冲,二三十分钟,时间长会损坏柱子),再用含有机相的水冲。如果是长时间走样,样品中的固体小颗粒堵了柱子,也只能反冲了。

看运气了,主要还是堵的状况了。 顺着不行就反过来吧。

如果你柱子已经堵了的话,用高于5%的有机相冲只会加重堵塞。先用纯水大流速冲冲吧,能救回来最好,不能就买新柱子,用的时候注意点了。带盐的缓冲要非常小心。ps,另外泵头那里好多牌子的仪器都有专门给无机盐流动相用的脱盐洗涤装置,防止泵结盐的,也去查查手册把这个打开吧。

压力很高应该选择压力低的溶剂。如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。

一般反相色谱,经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。

(3)把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。

如何防止HPLC柱子中磷酸盐堵柱子???

磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净,防止产生气泡和液相系统管路堵塞;运行过程中要开启活塞杆冲洗功能,防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损;跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱,防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞,最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱。

正确的冲洗方法是先用5%左右的硫酸水溶液冲洗一段时间,再用纯水冲洗一段时间,再用不同比例水—甲醇溶液冲洗,再用纯甲醇冲洗,之后再转为其它的有机流动相,整个过程要两个小时以上。在含盐流动相转为有机试剂流动相时,这些环节是不可以省略的,严重的时候,整个系统都有可能报废。

在夏季使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。即使保存在冰箱中,一般也不要超过两天。否则,即使不堵塞滤板,也会因细菌或霉菌孳生产生代谢物而造成对样品分析的干扰。

的磷酸盐不可以冲柱子。磷酸盐不溶于甲醇,直接冲柱子会产生堵柱堵泵现象,严重时柱子和泵会直接报废,一定要小心。采用乙腈,乙腈-水,水,水-甲醇,甲醇的顺序冲洗柱子。

做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去离子水、针剂水、纯净水(炊用)并不合适、尤其是做梯度洗脱时,水中的不纯物会成为鬼峰,从而干扰分析结果。

高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

磷酸盐流动相要超声脱气并用至少0.45um的滤膜抽滤干净,防止产生气泡和液相系统管路堵塞;运行过程中要开启活塞杆冲洗功能,防止磷酸盐盐析导致活塞杆被磨损;跑完样品后要先用大比例的水相冲洗系统管路和色谱柱,防止残留的磷酸盐盐析导致管路和色谱柱堵塞,最后再用高比例的有机相封存系统管路和色谱柱。

因此使用盐作为缓冲溶液的液相色谱仪在分析完成后,要及时使用适合的溶剂对系统进行冲洗,尽可能将系统中的盐晶体洗脱,否则长时间不处理,将极大损害液相色谱仪的使用寿命,无论进口,国产液相均如此。

上缓冲盐前注意用水相比例接近的流动相过渡,用后冲洗。注意有机相比例不可以太高,特别是有机相为乙腈时,比例高了缓冲盐会析出。配置时注意观察,如出现混浊即是缓冲盐析出。

流动相的pH值过高或过低,流动相使用纯水,使用高浓度磷酸盐缓冲溶液,使用离子对试剂等,均可能造成色谱柱填料被化学破坏,这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的。用缓冲盐做流动相时,在使用前和使用后都要用水清洗流路,绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置或更长时间。

含缓冲盐流动相的配制 配置缓冲盐使用的盐试剂也尽量使用色谱级纯,称样要精准,为了达到要求,选用合适量程的天平且每天使用前对天平校正。按要求配置好以后必须通过0.45μm或0.22μm滤膜过滤并超声脱气20min以上。注意:缓冲盐要临用新配。以上是正确配置高效液相色谱仪流动相的四个要点。

流动相的pH值过高或过低,流动相使用纯水,使用高浓度磷酸盐缓冲溶液,使用离子对试剂等,均可能造成色谱柱填料被化学破坏,这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的 用缓冲盐做流动相时,在使用前和使用后都要用水清洗流路,绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间。

各位小伙伴们,我刚刚为大家分享了有关磷酸盐进色谱柱的知识,希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决,欢迎随时提出哦!

觉得文章有用就打赏一下文章作者

支付宝扫一扫打赏

微信扫一扫打赏

阅读
分享